組織研磨均質(zhì)儀是實(shí)驗(yàn)室樣品制備常用工具，它通過碳化鎢小球或不銹鋼小珠在樣品管內(nèi)來回震蕩實(shí)現(xiàn)樣本的粉碎、混合、均化以及細(xì)胞破碎等，可以對(duì)硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速的粉碎和均相化處理，符合理化分析實(shí)驗(yàn)室的要求，配置不同體積、不同材料的研磨罐，可以進(jìn)行干磨、濕磨及冷凍研磨，也可以進(jìn)行細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取，在農(nóng)業(yè)、生物醫(yī)藥、食品、質(zhì)檢、高校等各行各業(yè)都有廣泛的應(yīng)用。

 

　　組織研磨均質(zhì)儀是實(shí)驗(yàn)室常見的儀器，很多實(shí)驗(yàn)人員知道組織研磨均質(zhì)儀可以用來研磨組織用來提取DNA，但是具體的實(shí)驗(yàn)步驟卻摸不清頭腦，今天我就拿研磨儀通過小鼠皮膚提取DNA來做個(gè)示范，不懂實(shí)驗(yàn)步驟的要拿筆好好記一下了。

 

　　實(shí)驗(yàn)步驟：

 

　　1、在2ml圓底離心管單管放入小鼠皮膚樣品40-50mg；

 

　　2、在離心管中加入5mm硬質(zhì)不銹鋼研磨珠1顆，蓋好管蓋，裝入鼎昊源TL1000自動(dòng)研磨儀適配器中；

 

　　3、將裝有樣品的適配器浸入液氮中；

 

　　4、待液氮不沸騰后取出，迅速安裝上機(jī)，采用間歇研磨方法；

 

　　5、間歇研磨參數(shù)設(shè)置為轉(zhuǎn)速2000rpm，每次自動(dòng)研磨1分鐘，間歇10s，循環(huán)4-5次效果好，從膠圖看RNA濃度較高；

 

　　6、研磨結(jié)束后，將離心管取出，每管加入裂解液（Trizol）0.5ml，之后進(jìn)行離心、純化等，做后續(xù)RNA提取實(shí)驗(yàn)。

 

　　根據(jù)我的試驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，使用研磨儀研磨小鼠皮膚，參數(shù)設(shè)置轉(zhuǎn)速大于1600rpm，其他設(shè)置均采用以上案例中設(shè)定不變，都可以成功研磨并提取RNA。不過采用案例中的方法自動(dòng)研磨效果好。