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近紅外活體成像系統(tǒng)觀察哺乳動物胚胎發(fā)育的意義

更新時間:2022-03-01瀏覽:924次
  近紅外活體成像系統(tǒng)是在不損傷動物的前提下對其進行長期縱向研究的技術(shù)之一。成像技術(shù)可以提供的數(shù)據(jù)有絕對定量和相對定量兩種。在樣本中位置而改變,這類技術(shù)提供的為絕對定量信息,如CT、MRI和PET提供的為絕對定量信息;圖像數(shù)據(jù)信號為樣本位置依賴性的,如可見光成像中的生物發(fā)光、熒光、多光子顯微鏡技術(shù)屬于相對定量范疇,但可以通過嚴格設計實驗來定量。其中可見光成像和核素成像特別適合研究分子、代謝和生理學事件,稱為功能成像;超聲成像和CT則適合于解剖學成像,稱為結(jié)構(gòu)成像,MRI介于兩者之間。
 
  體內(nèi)可見光成像包括生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶基因標記DNA,利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應底物發(fā)生生化反應產(chǎn)生生物體內(nèi)的光信號;而熒光技術(shù)則采用熒光報告基因(GFP、RFP)或熒光染料(包括熒光量子點)等新型納米標記材料進行標記,利用報告基因產(chǎn)生的生物發(fā)光、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光就可以形成體內(nèi)的生物光源。前者是動物體內(nèi)的自發(fā)熒光,不需要激發(fā)光源,而后者則需要外界激發(fā)光源的激發(fā)。
 
  哺乳動物胚胎發(fā)育是一個動態(tài)復雜的過程,既往研究方法包括組織染色、超聲、OCT(光學相干斷層成像)、MRI(磁共振成像)等,但是均不能在細胞水平上觀察胚胎發(fā)育的動態(tài)過程。
 
  利用近紅外活體成像系統(tǒng),我們在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)觀察到了神經(jīng)遞質(zhì)傳遞、大腦形成早期神經(jīng)嵴細胞分化的血管周細胞、視網(wǎng)膜發(fā)育過程中的細胞自噬、腺病毒遞送以及胎盤熒光化學藥物轉(zhuǎn)運等。通過與子宮內(nèi)電轉(zhuǎn)技術(shù)結(jié)合在大腦中標記特定細胞,觀察了細胞分裂及遷移。在同一人鼠嵌合體中追蹤了人神經(jīng)嵴細胞和鼠神經(jīng)嵴細胞的嵌合差異。
 
  通過構(gòu)建人鼠嵌合體,還可以對人類干細胞及前體細胞進行研究。

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